General description
KAPA SYBR ®快速qPCR 试剂盒包含首个通过定向进化改造的 DNA 聚合酶,以更耐受 SYBR Green I 染料抑制。
KAPA SYBR快速qPCR试剂盒具有提高的耐用性、加工性和速度,使得始终保持较高水平扩增效率,使基因表达分析的相对定量更加准确。KAPA SYBR快速qPCR试剂盒在严格的实时PCR反应条件下性能**,在信噪比(荧光)、循环域值 (Cq)、线性度和灵敏度方面都有显著改善。
Application
KAPA SYBR® FAST已可用于:
- 基因表达
- 基因敲除验证
- 微阵列验证
- ChIP分析
- 低拷贝检测
- NGS文库**定量
- 实时定量PCR
Features and Benefits
更准确地定量基因表达的变化
- 95-105% 之间的高反应效率可提高准确性和可重复性。
- 广泛 GC 含量和扩增子长度范围内的无偏效率。
持续检测低拷贝和困难靶标
- 进行性改善导致早期 Cq 评分。
- 在不同 AT 和 GC 含量的靶标上进行更高的荧光检测。
- 新型酶能抵抗 SYBR ®抑制。
仅需 40 min 即可完成实时 PCR 运行
- 快速循环方案的运行时间缩短 55%。
- 从标准协议切换到快速协议时保持高性能。
临时速记:
- 该试剂盒包含一种使用 SYBR Green I 染料化学方法优化 qPCR 的工程酶。
- 2X 预混液含有专有缓冲液。与新型酶一起,提高了富含GC和AT的靶的扩增效率。
- 95°C 下 20 s 的初始变性足以激活酶。 使用复杂模板时,建议将初始变性设置为 3 min。
- 对于 3 步循环,引物退火用 20秒,72°C 下延伸/数据采集用 1 秒。
- 反应体积不得超过 25μL。
Preparation Note
总是确保所有的组份在使用用彻底溶解并充分混合。KAPA SYBR ®Fast qPCR Master Mix (2X) 即使在-20°C 下储存,也可能无法冷冻。
KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) 中包含的 SYBR Green I染料和ROX/荧光素染料(取决于试剂盒配置)具有光敏性。 长时间暴露在直射光下会导致荧光信号强度下降。
KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) 经过30个冻融循环后仍稳定。当不使用时,确保所有试剂在-20°C的温度下避光储存。如果不被微生物和/或核酸酶污染,试剂在避光的情况下,在4°C的黑暗环境中稳定至少一个星期,并可在这个温度下储存以短期使用。
Analysis Note
所有试剂盒组份均经过严格的功能性质量控制,不存在可检测到的污染外切和内切酶活性,并满足严格的DNA污染要求。
Other Notes
仅供研究使用。不用于诊断操作。
Legal Information
Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
QuantStudio is a trademark of IROA Technologies LLC
SYBR is a registered trademark of Thermo Fisher Scientific or its subsidiaries
StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
| usage | sufficient for 100 reactions, sufficient for 1000 reactions, sufficient for 500 reactions, sufficient for 5000 reactions |
| shelf life | ≤12 mo. |
| feature | dNTPs included,hotstart |
| packaging | kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4600),kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4602),kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4601),kit of 50 mL (5000 x 20 μL rxn; KK4618) |
| manufacturer/tradename | Roche |
| concentration | 2 × |
| technique(s) | qPCR: suitable |
| input | purified DNA |
| compatibility | for use with Agilent Mx3000P,for use with Agilent Mx3005P,for use with Agilent Mx4000,for use with Applied Biosystems® 5700,for use with Applied Biosystems® 7000,for use with Applied Biosystems® 7300,for use with Applied Biosystems® 7500,for use with Applied Biosystems® 7700,for use with Applied Biosystems® 7900HT,for use with Applied Biosystems® ViiA 7,for use with QuantStudio™,for use with StepOne™,for use with StepOnePlus™ |
| detection method | SYBR® Green |
| storage temp. | −20°C |

