General description
17 kDa
对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。 每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+三甲基组蛋白H3（Lys4）组包括抗三甲基组蛋白H3（Lys4）抗体，阴性对照抗体（正常兔血清）和qPCR引物，可扩增人GAPDH基因启动子内的166个碱基对区域。 三甲基组蛋白H3（Lys4）和阴性对照抗体以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供，可用于功能上验证三甲基组蛋白H3（Lys4）相关染色质的沉淀。
组蛋白的甲基化可以发生在两个不同的残基上：精氨酸或赖氨酸。组蛋白甲基化可以与转录激活或抑制相关，具体取决于甲基化残基。组蛋白H3的赖氨酸4可以通过不同的组蛋白甲基转移酶（HMTs）（例如，SET1或ASH1）单甲基化、二甲基化或三甲基化。Lys4的甲基化通常与转录激活有关。脱甲基酶LSD1能够使组蛋白H3 Lys4脱甲基。
Immunogen
三甲基组蛋白H3（Lys4）抗体是针对含有序列…RT[me3K]QT…的BSA偶联合成肽制备的，其中me3K对应于人组蛋白H3的三甲基赖氨酸4
表位：三甲基Lys4
Application
染色质免疫沉淀：
未经处理或紫外线处理（6 hrs，50焦耳/平方米）制备的超声染色质。使用3 μL兔抗三甲基组蛋白H3（Lys4）和Magna ChIP
倍数增加是从标准曲线中提取的标准化平均IP量的比率（来自每个染色质样品的输入）。如其他研究中所观察到的，与该启动子相关的三甲基组蛋白（Lys4）免疫沉淀活性随紫外线处理而增加。
请参见EZ-Magna A ChIP
ChIP-seq分析：
使用Magna ChIP
蛋白质印迹分析和肽抑制：
代表性批次。HeLa酸提取物通过电泳分离，转移到硝酸纤维素膜上，并用抗三甲基组蛋白H3（Lys4）（1:2,000，泳道1）探测或用0.4 μM组蛋白H3肽预孵育，并进行以下修饰：泳道2：单甲基赖氨酸4，泳道3：二甲基赖氨酸4，泳道4：三甲基赖氨酸4。
使用与HRP偶联的山羊抗兔二抗和化学发光检测
系统观察蛋白质（请参见图）。
三甲基组蛋白H3（Lys4）ChIP验证的抗体&引物组，包括ChIP级抗体 & 特异性对照PCR引物用于H3K4Me3染色质免疫沉淀。
研究子类别
染色质生物学
研究类别
表观遗传学&核功能
Biochem/physiol Actions
三甲基化组蛋白H3（Lys4）
Packaging
25次测定/试剂盒，约3 μL/染色质免疫沉淀
Physical form
形式：纯化
抗三甲基组蛋白H3（Lys4）重组兔单克隆IgG。一个小瓶包含75 μL蛋白A纯化兔IgG，溶于储存缓冲液（0.1 M Tris-甘氨酸（pH 7.4）、0.15 M NaCl、0.05%NaN3，添加40%甘油）中。
正常兔IgG。一个小瓶包含75 μL正常兔IgG。
对照引物。一个小瓶包含75 μL的5 μM人GAPDH特异性引物。
用于：TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
REV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG CGA
Preparation Note
自收到之日起在-20°C可稳定保存1年
Analysis Note
对照
包括阴性对照抗体纯化兔IgG和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。
染色质免疫沉淀：
使用3 μL正常兔IgG或3 μL抗三甲基组蛋白H3（Lys4）单克隆IgG和Magna ChIP A（目录号17-610）试剂盒，对从未处理HeLa细胞制备的超声染色质（1 X 106细胞当量）进行染色质免疫。使用人GAPDH启动子侧翼对照ChIP引物通过qPCR验证了
三甲基组蛋白H3（Lys4）相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。关于实验详细信息，请参阅EZ-Magna A ChIP
Other Notes
抗三甲基组蛋白H3（Lys4）（纯化兔IgG），1小瓶
阴性ChIP对照兔IgG，1小瓶
ChIP引物GAPDH，1小瓶
Legal Information
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
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| biological source | rabbit |
| Quality Level | 100 |
| clone | monoclonal |
| species reactivity | mouse, human |
| species reactivity (predicted by homology) | mammals |
| manufacturer/tradename | ChIPAb+,Upstate® |
| technique(s) | ChIP: suitable (ChIP-seq),western blot: suitable |
| isotype | IgG |
| NCBI accession no. | NM_003493 |
| UniProt accession no. | Q66I33 |
| shipped in | dry ice |
| Gene Information | human ... H3F3B(3021) |
