产品介绍
Product Description
General description
T4 DNA 连接酶催化双链DNA中邻近的3′-羟基-和5′-磷酸末端之间磷酸二酯键的形成。双链DNA中单链切口也被T4 DNA连接酶封闭。
成分
T4 DNA连接酶，包括含有ATP的10倍浓缩连接缓冲液。
Application
连接粘性和平端DNA 片段。
Biochem/physiol Actions
热灭活：可以通过加热使酶失活（65℃，10分钟）。
Preparation Note
激活剂：Mg2+（10mM），DTT
工作溶液：为了稀释酶，Roche 建议使用含有缓冲液组分的缓冲液：20mM Tris-HCl，60mM KCl，1mM EDTA，5mM 二硫赤藓糖醇，50％ 甘油（v/v），pH 7.5（4℃）。
Analysis Note
质量
根据现行质量控制程序，测试不存在脱氧核糖核酸酶和核酸外切酶。
Other Notes
一个单位的T4 DNA 连接酶是在+ 37°C下在20分钟内将 1 nmol 32P 从焦磷酸盐转化为诺芮特可吸收材料的酶活性量。一个单位对应于在核酸外切酶III抗性测定中测定的0.2U。稀释缓冲液：50 mM Tris-HCl，10 mM 二硫赤藓糖醇，牛血清白蛋白，500 μg/ml，pH 7.6（+ 25°C）。
体积活性：1 x 103 U/ml； 5 x 103 U/ml
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
技术参数
Specifications
| biological source | Escherichia coli (NM 989) |
| recombinant | expressed in E. coli |
| description | recombinant form of the enzyme from T4 phage |
| form | solution |
| specific activity | ~3000 units/mg protein |
| packaging | pkg of 100 U (10481220001 [1 U/μl]),pkg of 500 U (10716359001 [1 U/μl]),pkg of 500 U (10799009001 [5 U/μl]) |
| manufacturer/tradename | Roche |
| parameter | 4-22 °C optimum reaction temp. |
| technique(s) | activity assay: suitable |
| optimum pH | 7.2-7.8 |
| storage temp. | −20°C |
