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脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺,200000UNITS,D4527-200KU,Sigma

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订货号 0BS5936
品牌型号 D4527-200KU
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产品介绍 Product Description

Application

DNAse I可用于切开DNA,作为将标记碱基插入DNA的**步。来自Sigma的酶已在Madin-Darby犬肾(MDCK)II细胞系的细胞裂解物制备中与RNAse一起用于核酸酶的储备。它也用于从辛德比斯病毒中提取RNA。
来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I已用于两种类似于脱氧核糖核酸酶I的新型人类基因的鉴定、定位和表达。来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I也已用于研究可从牛胰腺中获得高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的新方法。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。


Biochem/physiol Actions

DNase I是一种内切核酸酶,可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg2+存在时,DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn2+存在时,两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。最适pH在7-8之间。二价阳离子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca2+可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A,B,C和D组成,它们的摩尔比分别为4:1:1。仅有少量的D被发现。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。


Features and Benefits

有效 切割DNA及从蛋白质样品中去除DNA


Physical form

含有氯化钙


Preparation Note

酶粉可使用水或除磷酸盐缓冲液外任何pH 4.0-9.0的缓冲液进行重悬。应避免钙螯合剂。溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时,它可在60 °C维持活性最长达五小时,并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液((pH 7.2),1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。


Analysis Note

蛋白由双缩脲法测定。


Other Notes

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时,在 pH 5.0,25°C的条件下在每ml每分钟内可引起0.001的A260变化。


技术参数 Specifications
biological sourcebovine pancreas
Quality Level300
typeType II
formlyophilized powder
specific activity≥2,000 units/mg protein
mol wt ~31 kDa
purified bychromatography
compositionProtein, ≥80%
technique(s)DNA extraction: suitable
solubility0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear
suitabilitysuitable for molecular biology
application(s)diagnostic assay manufacturing
foreign activityChymotrypsin ≤0.01%,Protease ≤0.005%,RNase ≤0.01%
shipped inwet ice
storage temp.−20°C
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