General description
Taq DNA聚合酶是一种高度持续的5'→3'DNA聚合酶,缺乏3'→5'核酸外切酶活性。它是一个单一多肽链,分子量约为95kDa。
Taq DNA聚合酶最初是从嗜热真细菌 Thermus aquaticus BM中分离的,该菌种缺乏Taq I限制性内切酶。该酶已克隆至 大肠杆菌中。
Application
Taq DNA聚合酶可用于简单的常规PCR。Roche Applied Science Taq DNA聚合酶符合严格的纯度和质量标准。这种重组Taq DNA聚合酶的制备可用于:
- PCR
- RT-PCR
- qPCR
- 其他引物延伸反应,例如测序和标记
Features and Benefits
可靠的可重复结果:
批次间一致性高。
无需对每个批次进行测试:
Taq DNA聚合酶已经过严格测试。
防止PCR携带:
dUTP掺入与尿嘧啶-DNA糖基化酶的组合可防止PCR交叉污染。
Packaging
1个试剂盒包含2种组分
Analysis Note
常规检测具有中等大小的扩增子和50%的GC含量。Taq DNA 聚合酶没有校对或热启动功能。它在+75°C和pH 9下具有**活性。
不含限制性内切酶:
该酶最初从T. aquaticus BM中分离得到,该菌株缺乏Taq I限制性内切核酸酶活性。每个批次已使用λDNA进行PCR测试。根据当前的质量控制程序,还对每批次的外切酶和内切核酸酶的缺失以及切口活性进行测试。
Other Notes
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
在上述给出的测定条件下,一个单位Taq DNA聚合酶定义为在+ 65℃,60分钟内将10nmol总脱氧核糖核苷三磷酸插入至酸可沉淀DNA中所需的酶量。
单位检测:孵育缓冲液:
67mM Tris/HCl;pH 8.3/25℃,5mM MgCl2,10mM巯基乙醇,0.2%聚多醇,0.2mg/ml明胶,dATP、dGTP、dTTP各0.2mM,dCTP 0.1mM。
孵育步骤:
将M13mp9ss、M13引物(17mer)和1 μCi (α-32P) dCTP与合适稀释度的Taq DNA聚合酶在50μl培养缓冲液中于+65℃条件下,孵育60分钟。掺入的dNTP的量可通过三氯乙酸沉淀进行测定。
体积活力:5 U/μl
Legal Information
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| biological source | bacterial (Thermus aquaticus) |
| recombinant | expressed in E. coli |
| grade | Molecular Biology |
| form | liquid |
| usage | sufficient for ≤1,000 reactions (11146173001), sufficient for ≤10,000 reactions (11435094001), sufficient for ≤2,000 reactions (11418432001), sufficient for ≤5,000 reactions (11596594001), sufficient for ≤200 reactions (11146165001) |
| specific activity | 5 U/μL |
| mol wt | 95 kDa |
| packaging | pkg of 1,000 U (11418432001 [4 x 250 U]),pkg of 2,500 U (11596594001 [10 x 250 U]),pkg of 5,000 U (11435094001 [20 x 250 U]),pkg of 100 U (11146165001),pkg of 500 U (11146173001 [1 x 500 U]) |
| manufacturer/tradename | Roche |
| parameter | 72 °C optimum reaction temp. |
| technique(s) | DNA sequencing: suitable,PCR: suitable |
| color | colorless |
| optimum pH | ~9.0 (20 °C) |
| solubility | water: miscible |
| suitability | suitable for molecular biology |
| NCBI accession no. | AAA27507 |
| UniProt accession no. | P19821 |
| application(s) | genomic analysis life science and biopharma |
| foreign activity | Nicking activity 30 units, none detected,Ribonuclease 30 units, none detected,Unspecific endonucleases 30 units, none detected |
| storage temp. | −20°C |

