General description
组蛋白H3是参与真核细胞染色质结构的五种主要组蛋白之一。H3具有一个主要的球状结构域和一个长N末端的尾巴,其与核糖体核小体′串珠′结构体的结构有关。组蛋白H3的N末端尾部从球状核小体核心突起,其可能发生几种不同类型的表观遗传修饰,从而影响细胞过程。这些修饰包括甲基或乙酰基与赖氨酸和精氨酸的共价连接,以及丝氨酸或苏氨酸的磷酸化。组蛋白H3变体(H3.1,H3.2和H3.3)与细胞状态的表观遗传记忆有关。H3的全基因组模式取决于氨基酸序列,并随着发育调控基因座的细胞分化而变化。组蛋白H3基因中的体细胞错义突变存在于多种小儿脑和骨骼恶性肿瘤中,其中~90%的软骨母细胞瘤被鉴定出带有组蛋白H3K36M突变(H3K36M)。由于H3K36M 突变引起的H3K36 甲基化缺失导致H3K27甲基化的全组基因上调,从而引起多梳抑制复合物1(PRC1)分布的改变,以及涉及间充质分化的PRC1抑制的靶基因的重新激活。
观测分子量〜17 kDa。在一些裂解液中可能会观察到未表征的条带。
Immunogen
KLH偶联的线性肽,对应于带K36M突变的靶区域序列。
Application
免疫组化分析:一个代表性批次的1:50稀释液对带有组蛋白H3 K36M 突变的人成软骨细胞瘤组织的石蜡包埋切片进行免疫染色(由加拿大魁北克蒙特利尔麦吉尔大学Denise Bechet 和Nada Jabado提供)。
斑点印迹分析:一个代表性批次检测到代表含K36M突变(H3K36M)表位区序列的组蛋白H3 肽,但是没有检测到代表含未修饰甲基化K36残基的野生型序列的肽(Lu, C., et al. (2016).Science.352(6287):844-849).
免疫组化分析:一个代表性批次对带有H3.1K36M突变的人软组织未分化肉瘤的石蜡包埋切片进行免疫染色(Lu, C., et al. (2016).Science.352(6287):844-849).
免疫组化分析:一个代表性批次对小鼠异种移植物的石蜡包埋H3.1K36M突变肿瘤进行了免疫染色(Lu, C., et al. (2016).Science.352(6287):844-849).
免疫组化分析:一个代表性批次对带有H3.1K36M突变的人成软骨细胞瘤组织的石蜡包埋切片进行了免疫染色(Lu, C., et al. (2016).Science.352(6287):844-849)。
蛋白质印迹分析:一个代表性批次在表达K36M 突变体的鼠间充质祖细胞的组蛋白酸提取物中检测到目标条带,但是在野生型组蛋白H3.3中没有检测到(Lu, C., et al. (2016).Science.352(6287):844-849)。
蛋白质印迹分析:一个代表性批次在带H3K36M突变的人成软骨细胞瘤样品的组蛋白酸提取物中检测到目标条带,但是在不带H3K36M突变的人成软骨细胞瘤样品中没有检测到(Lu, C., et al. (2016).Science.352(6287):844-849)。
抗组蛋白H3 K36M 突变体抗体(货号ABE1447)是一种高度特异性的兔多克隆抗体,靶向组蛋白H3 K36M突变(H3K36M),并通过斑点印迹、免疫组化和蛋白质印迹法进行了测试。
研究类别
表观遗传学&核功能
Biochem/physiol Actions
基于100%的序列同源性,预期可与广各种物种反应。
该兔多克隆抗体特异性检测组蛋白H3 K36M 突变(H3K36M),与不带H3K36M 突变的组蛋白H3没有交叉反应。
Physical form
亲和纯化。
纯化的兔多克隆抗体,溶于含有0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。
Preparation Note
自收到之日起,在2-8°C条件下可稳定保存1年。
Analysis Note
通过蛋白质印迹法对HEK293转染子中的H3K36M过度表达进行评估。
蛋白印迹分析:该抗体的1:250稀释液在10 µg 的HEK293转染子裂解液中检测到过度表达的K36M突变体,但是没有检测到野生型人组蛋白 H3.3 。
Other Notes
浓度:请参考特定批次的数据表。
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| biological source | rabbit |
| Quality Segment | 100 |
| antibody form | affinity isolated antibody |
| antibody product type | primary antibodies |
| clone | polyclonal |
| purified by | affinity chromatography |
| species reactivity | mouse, human |
| species reactivity (predicted by homology) | bovine (based on 100% sequence homology), rabbit (based on 100% sequence homology), rat (based on 100% sequence homology), porcine (based on 100% sequence homology) |
| technique(s) | dot blot: suitable,immunohistochemistry: suitable,western blot: suitable |
| NCBI accession no. | NP_002098 |
| UniProt accession no. | P84243 |
| shipped in | ambient |
| target post-translational modification | mutation (Lys36Met) |
| Gene Information | human ... HIST1H3F(8968) |

