General description
MABE1144/1132/1133甲基胞嘧啶双加氧酶TET3（C 1.14.11.n2; UniProt O43151）由人TET3（也称为 KIAA0401）基因（基因 ID 200424）编码。TET（10-11易位）蛋白（TET1、TET2和TET3）将5-甲基胞嘧啶（5mC）氧化为5-羟甲基胞嘧啶（5hmC）、5-甲酰基胞嘧啶（5fC）和5-羧基胞嘧啶（5caC），为哺乳动物中主动表观遗传DNA脱甲基提供了一种手段。TET蛋白还将基因组胸腺嘧啶残基修饰为5-羟基尿嘧啶。TET蛋白依赖于Fe(II)和2-氧代戊二酸作为活性的辅因子，已知2-氧代戊二酸抑制其活性，而抗坏血酸则显示刺激TET介导的胞嘧啶氧化。此外，翻译后修饰（PTM），例如磷酸化和O-GlcNAc糖基化，也在调节TET蛋白的活性中起作用。发现TET1和TET2在小鼠胚胎干细胞（mESC）中高度表达，并且已知TET3在卵母细胞中上调并氧化沉默的父本原核DNA。还报道了神经元组织中高水平的TET蛋白和基因组5-羟甲基胞嘧啶。研究人员已经报道过三种TET3剪接亚型/变体，长的全长亚型Tet3FL和短的亚型 Tet3s在胚胎干细胞（ESC）向神经元谱系（neuronal lineage）的分化过程中上调，而 Tet3o对卵母细胞有特异性，在ESC或检测的成年小鼠组织的任何其它类型细胞中都没有检测到，表明Tet3o在小鼠受精卵中父系基因组（paternal genome）氧化中的作用。Tet3FL 和Tet3o 含有完整的 Tet3s序列和额外（但不同的）N末端序列。只有Tet3FL含有N末端CXXC结构域，该结构域结合未甲基化CpG并具有**的5caC亲和力。Tet3FL的活性远远低于Tet3o和Tet3s，说明CXXC结构域限制了Tet3FL 5mC 的氧化能力。
计算分子量：193.7/179.4 kDa （人亚型 Tet3FL/Tet3s）、194.8/180.4/185.1 kDa（小鼠亚型 Tet3FL/Tet3s/Tet3o）、166.7/77.47 kDa （UniProt 人亚型2/3）、 76.26 kDa （UniProt 小鼠亚型2）注意，UniProt亚型1（O43151-1/人和Q8BG87-1/小鼠）对应于亚型 Tet3s，而不是Tet3FL（NM_001287491.1/人和JX946278.1/小鼠）。
Immunogen
对应于人TET3 N 末端一半的内部序列的 KLH 偶联线性肽。
Application
免疫沉淀分析：10 µg 代表性批次从 500 µg 转染小鼠胚胎干细胞（mESC）裂解液中免疫沉淀了外源表达的小鼠TET3-GFP融合蛋白。
染色质免疫沉淀测序（ChIP-seq）分析通过ChIP-seq 分析 （每次ChIP10 µg ），采用转染至过度表达小鼠TET3的小鼠胚胎干细胞（mESC）制备的染色质制剂，一个代表性批次检测到 TET3 染色体染色体富集位点（由Reik lab, Epigenetics ISP, Babraham Institute, UK提供）
免疫细胞化学分析：一个代表性批次的1：250稀释液对转染至过度表达小鼠TET3 卵母细胞亚型Tet3o的4%多聚甲醛固定、0.5% Triton X-100-透化的小鼠胚胎干细胞（mESC）进行了免疫染色（由Reik lab, Epigenetics ISP, Babraham Institute, UK提供）
免疫细胞化学分析：一个代表性批次的1：250稀释液在4%多聚甲醛固定、0.5% Triton X-100-透化的小鼠受精卵中检测到TET3 卵母细胞亚型Tet3o的免疫反应性（由Reik lab, Epigenetics ISP, Babraham Institute, UK提供）
免疫沉淀分析：通过RIME（内源蛋白的快速免疫沉淀质谱联用技术），10 µg 代表性批次对内源性 OGT与来自转染小鼠胚胎干细胞（mESC）的外源过表达的鼠TET3进行了免疫共沉淀（由Reik lab, Epigenetics ISP, Babraham Institute, UK提供）。
抗-TET3（货号ABE290）是一种高度特异性的兔多克隆抗体，靶向甲基胞嘧啶双加氧酶TET3 ，并已在染色质免疫沉淀（ChIP）、ChIP-seq、免疫细胞化学、免疫沉淀和蛋白质印迹中进行了测试。
Biochem/physiol Actions
免疫原序列存在于Jin, S.G.等人报道的TET3亚型Tet3FL、Tet3s和Tet3o 剪接亚型（Jin, S.G., et al. (2016).Cell Rep.14(3):493-505），以及UniProt 报道的（O43151, Q8BG87）所有额外的人和小鼠TET3剪接亚型。注意，UniProt亚型1（O43151-1/人和Q8BG87-1/小鼠）对应于亚型 Tet3s，而不是Tet3FL（NM_001287491.1/人和JX946278.1/小鼠）。
Preparation Note
自收到之日起，在2-8°C条件下可稳定保存1年。
Analysis Note
通过蛋白质印迹在小鼠TET3 GFP 融合蛋白中进行了评估。
蛋白质印迹分析：2 µg/mL该抗体在10 µg转染小鼠胚胎干细胞（mESC）裂解物中检测到外源表达的小鼠TET3 GFP融合蛋白。
Other Notes
浓度：请参考特定批次的数据表。
| biological source | rabbit |
| Quality Level | 100 |
| conjugate | unconjugated |
| antibody form | affinity isolated antibody |
| antibody product type | primary antibodies |
| clone | polyclonal |
| purified by | affinity chromatography |
| species reactivity | mouse |
| species reactivity (predicted by homology) | human (based on 100% sequence homology), rat (based on 100% sequence homology), nonhuman primates (based on 100% sequence homology) |
| technique(s) | ChIP: suitable (ChIP-seq),immunocytochemistry: suitable,immunoprecipitation (IP): suitable,western blot: suitable |
| NCBI accession no. | NP_001274420 |
| UniProt accession no. | O43151 |
| shipped in | ambient |
| target post-translational modification | unmodified |
| Gene Information | human ... TET3(200424) |
