General description
单克隆抗体（mAb）Das-1最初被命名为结肠7E12H12，被认为是靶向40 kDa 的结肠特异性原肌球蛋白（TM）亚型或称TM相关蛋白。后来发现这种克隆体使得高分子量伴侣蛋白发生特异性免疫沉淀，该伴侣蛋白靶向人结肠上皮细胞中的原肌球蛋白5（TM5），随后该蛋白被命名为结肠上皮蛋白（CEP）。Das-1靶点是一种糖蛋白，其表观尺寸随糖基化水平变化。目标糖蛋白可从DLD-1 结肠癌细胞的质膜中免疫沉淀出来，表观分子量为185 kDa，从LS-180 结肠癌中分离的目标糖蛋白发生迁移，尺寸范围延伸至大于200 kDa的水平。据报道Das-1/CEP免疫反应性与Barrett食管化生、Barrett腺癌以及胃腺癌和癌相关肠化生（intestinal metaplasia）有关，但是在正常食道、胃或消除粘膜没有发现反应性。通过ELISA 和免疫印迹测试重组人原肌球蛋白亚型1-5时，五种hTM亚型都不与mAB DAS-1反应。通过免疫荧光和FACS 分析测定时，在多种结肠癌细胞系（DLD-1、LS180、T84）中检测到CEP/Das-1免疫反应性，但是在结直肠腺癌细胞系HT-29中没有检测到。在非结肠上皮细胞系（293-T、HeLa、胰腺癌）或造血细胞系（K562、KGI、Daud）中没有检测到CEP/Das-1免疫反应性。
观测值>200 kDa。根据糖基化水平而变化。
Immunogen
人结肠蛋白提取物
Application
抗-CEP（克隆Das-1（7E12H12））是针对CEP的抗体，用于免疫组织化学（石蜡）、蛋白质印迹、免疫沉淀、ELISA、斑点印迹。
蛋白印迹分析：在通过离子交换色谱生产货号MABC530以前，通过蛋白印迹分析，采用溃疡性结肠炎（UC）组织匀浆液、LS-180结肠腺癌细胞裂解液、 LS180 培养上清液和纯化的CEP测定腹水的CEP免疫反应性（材料由新泽西州UMDNJ-Robert Wood Johnson Medical School Kiron M. Das博士提供）。
蛋白印迹分析：一个代表性批次在高风险/癌变的胰腺导管内乳头状粘液瘤（IPMN）患者样品中检测到CEP（结肠上皮特异性蛋白）水平上升（Das, K.K., et al. (2014).Gut.63(10):1626-1634)。
蛋白印迹分析：一个代表性批次在在结肠腺癌细胞系LS180、分离的结肠上皮细胞和LS-180 培养上清液中检测到CEP，但是在正常空肠上皮细胞中没有检测到（Kesari, K.V., et al. (1999).Clin. Exp.Immunol. 118(2):219-227).
免疫沉淀分析：一个代表性批次使得人结肠腺癌细胞系 LS180的培养上清液中含CEP的原肌球蛋白发生免疫共沉淀（Kesari, K.V., et al. (1999).Clin. Exp.Immunol. 118(2):219-22）。
ELISA分析：一个代表性批次作为捕获抗体，与同型转化（ isotype switched）的mAb Das-1 IgG 检测抗体一起，采用纯化的CEP 和来自胰腺导管内乳头状粘液瘤（IPMN）患者的囊液样品进行检测 （Das, K.K., et al. (2014).Gut.63(10):1626-1634)。
免疫组化分析：一个代表性批次在高风险/癌变的胰腺导管内乳头状粘液瘤（IPMN）患者样品中检测到CEP（结肠上皮特异性蛋白）免疫反应性显著上升（Das, K.K., et al. (2014).Gut.63(10):1626-1634)。
免疫组化分析：通过荧光和非荧光免疫组织化学法，采用冷冻和福尔马林固定的石蜡包埋组织切片，代表性批次检测到CEP （结肠上皮特异性蛋白）免疫反应性，但是在小肠和肠上皮细胞中没有检测到（Moriichi, K., et al. (2009).Int. J. Cancer.124(6):1263-1269; Piazuelo, M.B., et al. (2004).Mod.Pathol.17(1):62-74; MIrza, Z.K., et al. (2003).Gut.52(6):807-812; Glickman, (2001).J.N., et al. Am J Surg Pathol.25(1):87-94; Griffel, L.H., et al. (2000).Dig.Dis.Sci. 45(1):40-48; Hamilton, M.I., et al. (1995).Clin. Exp.Immunol. 99(3):404-411; Halstensen, T. S., et al. (1993).Gut.34(5):650-657; Das, K.M., et al. (1987).J. Immunol. Vol. 139(1):77-84）。
斑点印迹分析：一个代表性批次在结肠蛋白提取物中检测到CEP免疫反应性（Hamilton, M.I., et al. (1995). Clin. Exp.Immunol. 99(3):404-411）。
Biochem/physiol Actions
克隆7E12H12（mAb DAS-1）与结肠上皮蛋白（CEP）发生特异性反应，但是不与人原肌球蛋白亚型（hTM1-5）反应。在多种结肠癌细胞系（DLD-1、LS180、T84）中检测到CEP/Das-1免疫反应性，但是在结直肠腺癌细胞系HT-29中没有检测到。在非结肠上皮细胞系（293-T、HeLa、HUVEC、胰腺癌）或造血细胞系（K562、KGI、Daud）中没有检测到CEP/Das-1免疫反应性。
Physical form
形式：纯化
Analysis Note
通过免疫组化在人结肠组织中进行了评估。
免疫组化分析：该抗体的1：1,000稀释液在人结肠组织中检测到CEP。
Other Notes
浓度：请参考特定批次的数据表。
| biological source | mouse |
| Quality Level | 100 |
| antibody form | affinity purified immunoglobulin |
| antibody product type | primary antibodies |
| clone | 7E12H12, monoclonal |
| species reactivity | human |
| technique(s) | ELISA: suitable,dot blot: suitable,immunohistochemistry: suitable (paraffin),immunoprecipitation (IP): suitable,western blot: suitable |
| isotype | IgMκ |
| shipped in | wet ice |
| target post-translational modification | unmodified |
